Laboratorios Romer está a la vanguardia del desarrollo de pruebas sensibles, robustas y prácticas. All About Feed habló con Kurt Brunner, Jefe de I+D, para saber más sobre sus actividades y cómo ve el futuro de las pruebas de micotoxinas.
Los métodos de muestreo para detectar micotoxinas han evolucionado mucho a lo largo de los años. Sin embargo, la búsqueda es hacerlas aún más salvajes y rápidas, por una razón económica y de seguridad de los alimentos/piensos. El objetivo es obtener resultados más cercanos al punto de venta. Las pruebas in situ en forma de tiras reactivas son una forma muy práctica de analizar las micotoxinas en la fábrica de piensos o en las instalaciones de almacenamiento. Romer Labs, con sede en Austria, es un experto en pruebas de micotoxinas y se centra en un aumento constante de la precisión y la utilidad a través de mejoras continuas de las tecnologías aplicadas.
]Biografía:
Kurt Brunner estudió Química Técnica en Viena, Austria y trabajó durante su doctorado en la Universidad Tecnológica de Viena y en la Universidad de Nápoles, Italia. Después de varios años de Postdoctorado en diferentes Universidades en Austria dirigió el «Grupo de Trabajo de Diagnóstico Molecular» en el Instituto de Agrobiotecnología (IFA-Tulln), Austria y desde 2015 es Jefe de I+D en Romer Labs. Kurt Brunner tiene más de diez años de experiencia en el campo de la investigación de micotoxinas.
¿Cómo ha evolucionado la investigación sobre micotoxinas en los últimos años?
«La investigación sobre micotoxinas ya comenzó a finales de los años 60. Durante esos años, el único método utilizado y disponible era la cromatografía en capa fina, en la que se interpretaban capas finas de sílice bajo luz ultravioleta. De esta manera se podían detectar las micotoxinas. Sin embargo, este método no era lo suficientemente sensible así que, poco después se desarrollaron nuevas herramientas de detección en los años 80. Una de ellas fue la cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC). Esta última se sigue utilizando hoy en día. También en los años 80, se desarrollaron las pruebas ELISA. Estos son sensibles y permiten un análisis de alto rendimiento, pero sólo pueden ser utilizados en laboratorios. Un gran desarrollo se vio a mediados de la década de 2000, cuando los dispositivos de flujo lateral llegaron al mercado. Estas tiras de prueba comenzaron como pruebas puramente cualitativas. Esto significa que la prueba daría un simple sí o no si la micotoxina estaba presente en un cierto nivel de corte. Año tras año, estas pruebas han sido mejoradas (como el uso de agua como disolvente, en lugar de disolventes tóxicos). Ahora estas tiras son consideradas como pruebas totalmente cuantitativas, lo que significa que se obtiene un número (nivel de ppb) como resultado. Una gran mejora a lo largo de los años ha sido la velocidad de las pruebas. Llevaría horas, pero ahora estamos hablando de sólo minutos. Las pruebas también se han hecho mucho más simples. Todo el mundo puede usarlas, después de un entrenamiento básico».
Romer Labs tiene pruebas respetuosas con el medio ambiente. ¿Qué significa esto?
«Muchas de las pruebas in situ se realizan con dispositivos de flujo lateral (tiras). Para hacer las pruebas se utiliza un disolvente orgánico para la extracción de muestras. Estos tienen que ser eliminados. Si se trabaja en un laboratorio, hay que eliminar los residuos orgánicos, pero no ocurre lo mismo en una fábrica de piensos u otros entornos no de laboratorio. Los disolventes orgánicos son prácticos y eficientes, fáciles de usar. Pero por otro lado, son tóxicos tanto para el operador como para el medio ambiente. Romer Labs desarrolló tiras de prueba que utilizan agua para la extracción en lugar de un disolvente orgánico. Así que las muestras diluidas no tienen que ser eliminadas con residuos orgánicos. Otra ventaja es que la muestra extraída puede ser usada para probar múltiples micotoxinas. No es sólo el medio ambiente lo que tenemos en mente, ya que también pretendemos que estas pruebas sean más fáciles y rápidas de usar. Estamos tratando de reducir todo el flujo de trabajo a sólo unos pocos pasos, ya que cada paso extra puede añadir tiempo de análisis y causar errores adicionales».
]Las tiras del dispositivo de flujo lateral se colocan en la incubadora y muy rápidamente el operador puede ver cuánta ppb está presente en la muestra. La línea superior de las tiras indica que la prueba funcionó correctamente. La intensidad de la línea inferior es indirectamente proporcional a la concentración de micotoxinas. La muestra correcta está muy contaminada.
¿Cómo garantiza que sus pruebas produzcan un resultado fiable?
«Nunca podemos garantizar resultados perfectos, ya que simplemente no podemos controlar a nuestros clientes. Pero junto a nuestros productos, ofrecemos servicios. Estos incluyen un entrenamiento adecuado donde educamos a la gente en cómo usar las pruebas y cómo tomar una muestra representativa. Además, tenemos pruebas fiables porque invertimos mucho esfuerzo en las validaciones. No se puede vender una prueba para cada producto o entorno. Esto es a menudo un concepto erróneo con los clientes. Compran una prueba y creen que pueden usarla para probar el maíz, el trigo o el pienso terminado. Pero cada fórmula de alimento tiene diferentes ingredientes y cada ingrediente influye en la prueba a su manera. Esto puede llevar a resultados más altos (sobreestimación) o a la subestimación. Especialmente cambiar el contenido de la soja (proteína y grasa) influye significativamente en los resultados de la prueba. Por esta razón, trabajamos fuertemente en las validaciones. Esto significa que empezamos a validar cada prueba para las materias primas simples como el maíz, el trigo, la cebada, etc. Después de eso, hacemos lo mismo para las materias primas más complejas (como los DDGS y la harina de gluten de maíz). El siguiente (y más complicado) es el alimento terminado. Este es un tema complejo, ya que nunca se sabe lo que contiene! Pero es muy importante adaptar cada prueba a nuestros clientes para asegurarnos de que la matriz de alimentación no influye en los resultados de la prueba. El efecto de la temperatura ambiente (piense en las condiciones tropicales, comparadas con las condiciones del norte de Europa) se evita ya que las tiras de prueba se miden en una incubadora a una temperatura constante de 45° Celsius. También seguimos desafiando nuestras propias pruebas para mejorarlas».
¿Qué se puede mejorar en las pruebas/muestreo de micotoxinas en general?
«Estamos mejorando constantemente. Cuando hemos lanzado un nuevo producto, ya estamos ocupados con la próxima generación de ese producto. Las mejoras se hacen también cuando se obtiene retroalimentación del mercado. Además, siempre estamos buscando anticuerpos de mejor rendimiento, que son necesarios para hacer las pruebas más sensibles. En la práctica, esto significa que se puede diluir la muestra aún más. Y al hacer esto, se reduce el efecto que los diferentes ingredientes de la muestra pueden tener en el resultado de la prueba. Algunas personas piensan que esto creará más problemas a medida que encontremos más, pero no es así. No encontramos más micotoxinas, pero obtenemos resultados más fiables. E incluso si el usuario ahora mide una concentración de 300 o 400 ppb de DON en una muestra, saben que esto está muy por debajo de los límites reglamentarios. En cuanto a la toma de muestras, hay muchos instrumentos y directrices útiles (por ejemplo, de la UE y la FAO). Éstas orientarán al profesional de la alimentación para que no tome una muestra de un gran lote y la convierta en una muestra analítica (que es otra cosa). Estas directrices de la UE se publicaron en 2006 y son muy buenas, por lo que no espero que cambien en los próximos años».
¿Cómo se desarrolla una prueba para nuevas micotoxinas (o micotoxinas/ metabolitos enmascarados)?
«Hacer una prueba novedosa para una nueva micotoxina siempre comienza con el desarrollo de anticuerpos. Y esta suele ser la fase más larga. En Laboratorios Romer tratamos de desarrollar estos anticuerpos en casa. Pero también puede ser que usemos anticuerpos de partes externas. No puedes comprarlos de un catálogo. Es un negocio muy complejo y que consume mucho tiempo. Los anticuerpos son producidos hoy en día por cultivos celulares. Esto nos permite tener una calidad constante de los anticuerpos. Una vez que tienes los anticuerpos que quieres para esa (nueva) micotoxina específica, también tienes que desarrollar los diferentes reactivos. Estos se utilizan para crear la línea de prueba y control en las tiras de prueba, que se basan en nanopartículas de oro modificadas. Estas tienen que ser ajustadas al anticuerpo específico utilizado. Una vez hecho esto tenemos una tira prototipo, y entonces comienza el trabajo real. Tenemos que probar esta tira prototipo para todos los productos principales, los ingredientes complejos y el alimento terminado. Pero también probamos diferentes concentraciones, diferentes micotoxinas (para evitar una reacción cruzada no deseada) y diferentes fuentes de las materias primas. Puedes imaginar que necesitamos manos extras durante esta fase».
¿Cuáles son los temas de investigación actuales en los que trabaja Romer Labs?
«En primer lugar, tenemos un amplio enfoque en los temas de investigación. Nuestra estrategia general es mejorar nuestros productos existentes. Pero la mayor parte de nuestro tiempo lo dedicamos a desarrollar nuevos productos, lo que también implica una investigación fundamental. A menudo, los cambios en el mercado y la regulación deciden hacia qué dirección se dirigen nuestros esfuerzos de investigación. En este momento, la próxima regulación para los alcaloides del cornezuelo (esperada para este verano) es un tema candente. Por el momento no hay casi ningún método de prueba simple para los cornezuelos, así que tan pronto como la AESA dio su opinión sobre este tema, empezamos a desarrollar productos que sirvan a estas demandas. Esta es la clara «estrategia de atracción» dentro de nuestra empresa. No queremos empujar los productos al mercado. Pero queremos obtener información de nuestros clientes y desarrollarla de acuerdo a sus necesidades. Por eso nuestra gente vigila de cerca las opiniones de la AESA, por ejemplo, ya que a menudo estas opiniones se traducen en nuevas regulaciones».
¿Cómo será la prueba de micotoxinas en 5 años?
«Francamente, no espero grandes cambios en las pruebas de micotoxinas en los próximos años. Por supuesto, los productos serán mejorados, y con suerte podremos hacer pruebas que puedan medir múltiples micotoxinas al mismo tiempo. Pero esto es un desafío. Para lograr grandes avances podríamos tener que mirar a un lapso de diez años. Esto se debe a que las nuevas tecnologías están disponibles primero en el sector de los diagnósticos clínicos. Sin embargo, el dinero que se puede gastar en pruebas en el sector de alimentos y piensos es menos de lo que la gente está dispuesta a gastar en el área médica. A menudo hay una diferencia de diez veces. Pero espero que las nuevas tecnologías se abaraten en el futuro y puedan utilizarse también para las pruebas de alimentos y piensos. Piense en los biosensores y en la tecnología de los chips, por ejemplo. Las posibilidades de usar estas herramientas para la prueba de micotoxinas en el futuro es emocionante».
Manténgase al día sobre las micotoxinas: Esta herramienta interactiva proporciona información sobre el impacto en la salud del ganado, de la A a la Z de las micotoxinas, además de las regulaciones para las micotoxinas por producto por país.
Laboratorios Romer, parte del Grupo Erber, es un proveedor global de soluciones de diagnóstico para micotoxinas, patógenos de alimentos, alérgenos de alimentos, gluten, OGM, residuos de medicamentos veterinarios y otros contaminantes de alimentos. Tiene cuatro laboratorios de servicio totalmente acreditados en EE.UU., Austria, Reino Unido y Singapur. Romer Labs fue fundado en 1982 en Washington, EE.UU. como un servicio de pruebas para micotoxinas. En 1999, la compañía fue adquirida por Erber AG. En 2002, se fundó Romer Labs Diagnostic GmbH en Austria. El traslado a los terrenos del campus cerca del instituto de investigación de micotoxinas líder en el mundo, IFA Tulln, en 2005, ha sido un paso importante y estratégico. El IFA-Tulln fue fundado en 1994 como una institución de investigación conjunta de tres universidades importantes de Viena, la Universidad de Medicina Veterinaria de Viena (VetMed), la Universidad Tecnológica de Viena (TUW) y la Universidad de Recursos Naturales y Ciencias de la Vida de Viena (BOKU). La idea ha sido permitir la colaboración de científicos con antecedentes complementarios en la esfera interdisciplinaria de la agrobiotecnología bajo un mismo techo. «La proximidad a los institutos de investigación del campus de Tulln y el surgimiento de proyectos de desarrollo conjuntos han sido beneficiosos para ambas partes, el mundo académico y los laboratorios Romer. El campus de Tulln se considera a menudo como el punto neurálgico mundial de la investigación sobre micotoxinas y estamos muy orgullosos de formar parte de él», explica Cristian Ilea, Jefe de Marketing de Romer Labs.
